組織駐留巨噬細胞是一類異質性的免疫細胞群體，參與組織穩態、重塑和免疫監視。在睪丸中，組織駐留巨噬細胞占體細胞群體的很大比例，是主要的白細胞類型（占比超過CD45至少50%以上）。睪丸組織駐留巨噬細胞被認為在發育期和成年期具有多種功能。在胚胎期，它們調控血管生成和形態發生。早期對出生后小鼠的研究，主要分析培養中分離的細胞類型，暗示了睪丸巨噬細胞對類固醇生成的重要性。在體內穩態條件下，有報道顯示組織駐留巨噬細胞提供了適宜的組織微環境，支持萊迪希細胞功能，并協助精原細胞分化。睪丸巨噬細胞還被認為與維持睪丸的免疫抑制環境有關。
在睪丸中已經鑒定出兩種組織駐留巨噬細胞群體。小管周巨噬細胞位于精曲小管表面，緊鄰小管周肌樣細胞，而間質巨噬細胞則分布在睪丸間質中，與Leydig細胞密切接觸。目前，普遍認為小管周巨噬細胞來源于循環的骨髓來源單核細胞，而間質巨噬細胞則起源于胎兒卵黃囊來源的細胞，但出生后會被骨髓來源的巨噬細胞所替代。然而，目前尚未有關于睪丸巨噬細胞發展全景的高分辨率單細胞綜合分析的報道。
在本研究中，我們結合細胞命運追蹤、荷蘭Liposoma氯膦酸鹽脂質體聯合抗體清除睪丸巨噬細胞，以及巨噬細胞缺陷小鼠實驗，采用深入的高維單細胞蛋白質組學分析，研究睪丸組織駐留巨噬細胞的發育起源及更新。我們證明，在正常生理條件下，成年睪丸的組織駐留巨噬細胞來源于胚胎前體細胞，而出生后這些巨噬細胞對精子發生并非必需。這一發現深刻改變了我們對睪丸巨噬細胞異質性、起源及功能的理解，并揭示了其與其他部位組織駐留巨噬細胞相比的獨特適應性。
睪丸巨噬細胞Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體清除文獻參考解決方案：
種屬：小鼠
年齡：十天
試劑：CSF1中和抗體（Bioxcell，美國）和clodronateliposomes氯膦酸鹽脂質體（Liposoma，荷蘭），以消耗組織巨噬細胞和血液單核細胞。
方法：腹腔注射CSF1抗體（Bio X Cell，克隆5A1）或IgG1同型對照（Bio X Cell，克隆HRPN）（第一周期500 µg，第二和第三周期250 µg），隨后在次日靜脈注射ClodronateLiposomes氯膦酸鹽脂質體或ControlLiposomes空白對照脂質體（Liposoma；體積50 µl）。每三天進行三個連續的注射周期。
取樣：在最后一次ClodronateLiposomes氯膦酸鹽脂質體注射40小時、11天或21天后采集組織進行流式細胞術和成像分析
αCSF1：CSF1中和抗體；Clod：ClodronateLiposomes
檢測：
恢復：
骨髓來源的單核細胞至少在3周時間內，無法占據即使被清除劑定居巨噬細胞所空出的睪丸生態位。
如何清除睪丸巨噬細胞？詳細信息可以參考如下文獻。
論文信息：
論文題目：Generation, localization and functions of macrophages during the development of testis
期刊名稱：Nature Communications
時間期卷：11, Article number: 4375 (2020)
在線時間：2020年9月1日
DOI： doi.org/10.1038/s41467-020-18206-0
產品信息：
貨號：CP-005-005
規格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
產地：荷蘭
名稱：Clodronate Liposomes&Control Liposomes
辦事處：Target Technology(靶點科技)
Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體聯合抗體清除骨髓，骨髓來源的血液單核，還有重點研究的部位睪丸巨噬細胞，荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：睪丸發育過程中巨噬細胞的產生、定位及功能。
Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體清除睪丸巨噬細胞的材料和方法：
Ten-day-old wild-type mice were treated with CSF1 neutralizing antibody and clodronate-containing liposomes to deplete tissue macrophages and blood monocytes. Intraperitoneal injection of CSF1 antibody (Bio X Cell, clone 5A1) or IgG1 isotype control (Bio X Cell, clone HRPN) (500?µg on the first cycle, 250?µg on the second and third cycles) was followed by intravenous administration of clodronate-containing or empty control liposomes (Liposoma; in 50?µl volume) on a subsequent day. Three consecutive treatment cycles were performed at three-day intervals. Tissues were harvested for flow cytometry and imaging analyses 40?h, 11 days, or 21 days after the last clodronate injection
材料和方法文獻截圖：
